Перекрестный метод определения группы крови

Современные методы исследований позволяют определить группу крови и установить резус-фактор у человека. Они необходимы при переливании, сильном кровотечении. Диагностика включает первичное и вторичное определение, в которое входит перекрестный метод. Как он проводится и какую работу осуществляет лаборант?

Прямой метод — это обнаружение антигенов А и В или их отсутствие в крови человека. С этой целью применяется стандартный набор изогемагглютинирующих сывороток. Одновременно в этом проводят перекрестный метод определения группы крови https://sangvitest.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi/ – выявляют антитела α и β при взаимодействии со стандартными образцами эритроцитов.

Методика перекрестного исследования

В лабораторных условиях исследуется кровь с образцами стандартных эритроцитов. С этой целью они применяются 3 основных групп крови человека — I, II, III для проведения реакции.

Метод включает несколько основных этапов работы:

1. Проводится забор из вены пациента в подготовленную пробирку для анализа;

2. Кровь помещается в центрифугу, оставляется для образования сыворотки в течение ближайших 30 минут;

3. Лаборант наносит 3 капли сыворотки большего объема до 0,1 мл каждая на маркированный планшет;

4. Вблизи наносит небольшую каплю с образцом стандартных эритроцитов в объеме 0,01 мл;

5. Пары капель перемешиваются стеклянной палочкой, затем слегка наклоняют планшет с лунками из стороны в сторону и визуально смотрят 5 минут;

6. В образовавшиеся капли с реакцией агглютинации капают 0,9 % NaCl и оценивают результат.

Реакция с выраженной агглютинацией с добавлением стандартной группы эритроцитов:

• A (II) и B (III) подтверждает присутствие агглютининов α и β, что и помогает определить 0 (I);

• Реакция исключительно с B (III) отображает содержание агглютинина β, так идентифицируется кровь A (II);

• Агглютинация произошла с образцами эритроцитов A (II) — это свидетельствует о наличии агглютинина α, присутствующего в группе B (III);

• В случае отрицательной реакции в каждой лунке считается, что все эти агглютинины отсутствуют, это подтверждает AB (IV).

Как определить группу крови стандартной сывороткой

Одновременно проводится анализ со стандартным набором изогемагглютинирующих сывороток. С этой целью также применяется реакция агглютинации.

Исходные материалы для лаборанта:

• Сыворотка разных групп крови человека бесцветной, синей, красной и желтой окраски соответственно для I, II, III и IV группы;

• 0,9 % раствор NaCl;

• Белые планшеты с лунками и маркировкой согласно группе крови;

• Набор палочек из стекла для лабораторного анализа.

Методика исследования:

• Подготовленный планшет с лунками подписывается с указанием ФИО пациента;

• Затем наносят две серии образцов со стандартной сывороткой каждой группы в объеме 0,1 мл, выстраиваемой в 2 ряда по 3 капли каждый с нанесением капель поочередно в порядке, начиная с левого края — 0 (I), A (II), B (III);

• Проводится забор крови шприцом из вены на анализ;

• 6 капель переносят на планшет при помощи стеклянной палочки и помещают впритык с образцом стандартной сыворотки, а затем смешивают;

• В результате контакта через 30 секунд происходит реакция агглютинации;

• Там, где она наблюдается, необходимо прибавить каплю 0,9% раствора NaCl.

Лаборант оценивает результат визуально. Если наблюдается лепестковая или пескообразная агглютинация, все это подтверждает положительный результат. Красная капля без изменений — это свидетельствует об отсутствии реакции.

Агглютинация помогает определить группу крови человека. Она происходит в течение 5 минут.

Параллельно определяется AB (IV) группа крови при помощи этой реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками. Лаборант наблюдает положительную реакцию в каждой группе. Это подтверждает наличие обоих агглютиногенов А и В.

В этом случае проводятся дополнительные исследования. Лаборант применяет изогемагглютинирующую стандартную сыворотку для AB (IV) группы. Она не содержит агглютинины. Поэтому не происходит агглютинация. Это позволяет идентифицировать AB (IV) группу крови.

Оценка перекрестного метода

В качестве контрольного образца используются эритроциты группы 0 (I). Результат положительный при совпадении ответов со стандартными эритроцитами и изогемагглютинирующими сыворотками.

Если оба ответа идентичны, результат о группе крови считается верным. В противоположном случае обе реакции проводят повторно.